Soporte SIM: conceptos básicos, preparación y uso

esta El camino es Es un agar semisólido y diferencial que se utiliza específicamente para detectar ciertas bacterias, principalmente Enterobacteriaceae. Radica en asperina, peptona, sulfato de hierro, sulfato de amonio, tiosulfato de sodio y agar.

Este medio permite tres pruebas esenciales: Sulfuro de hidrógeno (H.2S), capacitación y movimiento del indol, de ahí la abreviatura SIM. Por su gran practicidad, no debe faltar en el laboratorio de bacteriología.

Tarjeta SIM promedio
A. Soporte SIM comercial B. SIM H2S (-), indol (-) y prueba de motilidad (+) y H2S SIM (+), indol (-), prueba de motilidad (+). Fuente: A. La foto fue tomada del autor MSc. Marielsa Gil B. Mfloayza [CC BY-SA 3.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0)]

En contraste a otros medios, ha de ser semisólido para probar la movilidad de determinadas bacterias. En este sentido, la prueba es muy efectiva contra Enterobacteriaceae, pero no apta para bacilos gramnegativos no fermentadores, aquí es preferible usar otros métodos, como el método de goteo colgante.

Los medios SIM tienen la posibilidad de distinguir ciertas propiedades concretas que caracterizan la relación entre ciertas bacterias y otras bacterias, p. Ej. Escherichia coli Premiado H2S (-), indol (+) y motilidad (+) y Proteus mirabilis Él h2S (+), indol (-), motilidad (+).

establecido

Es un medio que se considera distinguido porque su uso distingue a los microorganismos que pueden generar sulfuro de hidrógeno de los que no; asimismo destaca los que forman indol desde el triptófano y los que no forman indol, distinguiendo al final las bacterias móviles de las inmóviles.

Fuente de energía

Como cualquier medio, contiene elementos que aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo de microorganismos no deseados. Estos elementos están representados por peptona y asperina.

El avance de microorganismos en el medio de cultivo es fundamental para lograr ver la presencia o ausencia de las características evaluadas por el medio de cultivo.

Producción de sulfuro de hidrógeno

La letra S del acrónimo SIM tiene relación a la producción de sulfuro de hidrógeno (H.2S). Las bacterias que pueden producir sulfuro de hidrógeno absorben azufre del tiosulfato de sodio.

Una vez H2S - un gas incoloro - que tiene una reacción con la sal de hierro que se encuentra en el medio para conformar sulfuro de hierro (II) precisamente aparente (precipitado negro). Bacterias que no son forma H.2Sí, dejaste el color original (beige) en el medio.

La presencia de detritos negros dificulta la interpretación de la motilidad; sin embargo, se sabe que la mayoría de las enterobacterias productoras de hidrógeno son2S es un movimiento positivo, como Salmonella, Proteus y Citrobacter. Además de esto, el precipitado negro que cubre casi todo el medio señala motilidad activa.

Formación de indol

La segunda letra del acrónimo SIM es "I" y significa capacitación de indol.

En este sentido, el aspertino tiene otra función básica aparte de ser un complemento alimenticio. Esta peptona es rica en un aminoácido llamado triptófano, por lo que puede enseñar bacterias que producen triptofanasa.

Esta enzima es quien se encarga de descomponer el aminoácido triptófano, que luego forma indol (una sustancia incolora), piruvato y amonio.

Por esta razón, es necesario añadir una substancia informativa (reactivo de Ehrlich o reactivo de Kovac) para advertir esta reacción. Ambos reaccionan con el indol y forman un anillo colorado púrpura en la área del agar. Si aparece un anillo colorado-violeta, la prueba de indol se interpreta como positiva.

Las bacterias que no tienen esta enzima no forman un bucle, lo que se interpreta como una prueba de indol negativa.

Es importante enfatizar que la prueba del indol debe explicarse en último rincón, pues después de añadir el reactivo, el medio se regresa turbio y se hace difícil la agitación.

deportividad

Al final, las letras "M" provienen de la palabra SIM, que significa "ejercicio". Para poder apreciar la motilidad, este medio es estratégicamente semisólido, pues esta propiedad es fundamental para lograr ver la presencia de movimientos bacterianos. Las bacterias flagelos son las que dan esta prueba positiva.

Si se observa turbidez en y cerca del inóculo inicial, se observará una prueba positiva. En lugar de desplazarse, las bacterias solo medran en todo el sendero del inóculo inicial.

Elaborar

Tarjeta SIM promedio

Pesar 30 g de medio de deshidratación y disolver en 1 litro de agua destilada. Deje descansar la mezcla a lo largo de 5 minutos, luego deje que hierva, mezclando con cierta frecuencia, hasta el momento en que se disuelva completamente.

La mezcla se vertió en tubos de ensayo con tapones de algodón y se esterilizó en autoclave a 121 ° C a lo largo de 15 minutos. Retire la reja para cilindros del autoclave y congélela en posición vertical a fin de que el medio se vuelva grumoso.

Para conservarlo se conserva en el frigorífico hasta su uso. El pH final del medio preparado debe ser de 7,3 ± 0,2.

Durante la inoculación, el medio debe estar a temperatura ambiente. El color medio es beige.

Reactivo de Kovac

Mida 150 ml de pentanol o alcohol isoamílico o butanol. (Utilice entre los tres nombrados).

Disuelva 10 gramos de p-dimetilaminobenzaldehído. Entonces añada lentamente 50 ml de ácido clorhídrico concentrado.

Los reactivos listos para usar son incoloros o de color amarillo claro. Debe almacenarse en una botella de color ámbar y conservarse en el frigorífico. Si es de color cobrizo obscuro, no lo use, señala daño. Para Enterobacteriaceae, este reactivo es la primera opción.

Reactivo de Erlich

Pesar 2 g de p-dimetilaminobenzaldehído, disolver en 190 ml de etanol absoluto y combinar de forma lenta con 40 ml de ácido clorhídrico concentrado. Almacene los reactivos de Kovac de la misma forma. El reactivo de Ehrlich se usa más generalmente para bacterias anaeróbicas y no fermentadoras.

usar

El medio SIM se usa ampliamente en laboratorios bacteriológicos. Su ventaja es que las tres especificaciones básicas de identificación de Enterobacteriaceae se pueden observar en un mismo tubo.

siembra

La correcta siembra de este medio radica en usar una aguja, que sirve para tomar una parte de la colonia pura a examinar y también insertarla perpendicular al centro del medio. Debe haber una hendidura. La punción no debe llegar en el fondo del tubo, el enfoque correcto es contemplar solo dos tercios de la profundidad.

No se recomienda la revacunación en tanto que lleva a una mala interpretación de las campañas positivas. El medio sembrado se hizo crecer aeróbicamente a 37 ° C a lo largo de 24 horas.

Una vez que se concluya el tiempo, vea si se genera H2Se leen S y motilidad. Finalmente se forma indol, agregue 3-4 gotas de reactivo de Ehrlich o Kovac, revuelva bien y explique.

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Fuente: E. Koneman, S. Allen, W. Janda, P. Schreckenberger, W. Winn (2004). Diagnóstico microbiológico. La quinta edición. Pan American SA Argentina.

Control de calidad

Como control estéril, se incubaron uno o dos cilindros en un horno a 37 ° C sin sembrar a lo largo de 24 horas. Se espera que más tarde no haya desarrollo ni cambio de color.

Como control de calidad, puede usar cepas certificadas reconocidas, como: Escherichia coli Antes de Cristo 25922, Enterobacter aerogenes Centro de control de tráfico aéreo 13048, Klebsiella pneumoniae Centro de control de tráfico aéreo 13883, Salmonella typhimurium Antes de Cristo 14028, Shigella Antes de Cristo 29930, Proteo Antes de Cristo 13315.

El resultado esperado es: Escherichia coli H2S movimiento negativo, indol y positivo, Enterobacter aerogenes Solo motivación efectiva, Salmonella typhimurium H2S y motivación efectiva e indol negativo. Proteo Son todos positivos mientras Neumonía por KlebsiellaShigella Todo es negativo.

frontera

-Ciertas tribus MorganelleEn otras cepas, gracias a la producción de melanina en este medio, puede formarse un pigmento marrón, que no debe confundirse con la precipitación de sulfuro de hierro. En profesionales sin experiencia, esta situación conduce a resultados falsos positivos a la hora de interpretar la prueba H.2S.

- Las bacterias estrictamente aeróbicas solo se desarrollan en la superficie del tubo, con lo que la motilidad es difícil de argumentar.

realizar referencia a

  1. Laboratorio de BD. Soporte BBL SIM. 2008. Disponible en: bd.com
  2. Laboratorio Neogen. Soporte SIM Disponible en: Seguridad alimentaria
  3. Difco Francisco Soria Mergizzo. Medios SIM. 2009. Disponible en: http://f-soria.es
  4. Laboratorio Brizuela. Laboratorio de medios SIM. Libre en: .brizuela-lab.com
  5. Laboratorio británico. Tarjeta SIM promedio. 2015. Disponible en: studyres.es/doc
  6. Koneman E., Allen S., Janda W., Schreckenberger P., Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico. 5ª edición. Pan American SA Argentina.

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