Agar verde claro: bases, preparación y empleo y

Estas Agar verde claro Es un medio sólido con alta selectividad. Se usa particularmente para aislar cepas de Salmonella, pero hay algunas salvedades como: B. Bacterias tifoideas y paratifoideas que no tienen la posibilidad de medrar en este medio.

La salmonela se encuentra con frecuencia en muestras de heces, agua o alimentos. En este sentido, este medio es muy útil. Este agar fue elaborado por Kristensen, Lester y Jürgens en 1925 y posteriormente cambiado por Kaufman.

Agar verde claro
Agar verde claro. Estas son colonias fermentadas y colonias no fermentadas. Fuente: MJ Richardson / Exposición de mundos invisibles 2012geograph.org.uk/photo/2815842 Licencia Creative Commons.

Consiste en polipéptona lograda de la digestión de péptidos de tejidos animales y caseína pancreática, y tiene dentro extracto de levadura, cloruro de sodio, lactosa, sacarosa, colorado fenol, verde claro y agar.

Su particularidad es que es un ámbito poco propicio para que la mayoría de las bacterias promuevan el crecimiento de Salmonella, pero algunos coliformes pueden subsistir y su avance es deficiente.

Cabe apuntar que Shigella no medrará ni crecerá en este ambiente. Salmonella typhimurium, usted Salmonella paratyphi. Por tanto, si quiere aislar estos microorganismos, debe usar otros medios como el agar XLD.

Apoyado

Agar verde claro

Cada componente del medio tiene una función específica que establece las propiedades y propiedades del agar.

La pluripeptona y el extracto de levadura son fuentes de nutrientes de las que los microorganismos pueden obtener el nitrógeno y los minerales necesarios para su desarrollo. La lactosa y la sacarosa son fuentes de energía para los microorganismos que tienen la posibilidad de fermentarlas.

El verde claro es una substancia inhibidora que inhibe el crecimiento de bacterias grampositivas y un sinnúmero de microorganismos gramnegativos.

El cloruro de sodio confiere seguridad osmótica al medio. Aunque el rojo fenol es un indicador de pH, cambia de color en el momento en que se detectan los ácidos producidos por la fermentación de los hidratos de carbono.

En este medio se desarrollan colonias de lactosa sin fermentar y sacarosa en rosa transparente o blanco sobre fondo rojo. Por ejemplo, la bacteria de la salmonela.

Las bacterias que fermentan lactosa o sacarosa que tienen la posibilidad de crecer en este medio forman colonias de color amarillo verdoso o amarillo verdoso sobre un fondo amarillo verdoso. ¿Por poner un ejemplo? Escherichia coli y Klebsiella pneumoniae.

Variación de agar verde claro (BGA)

Hay otras variedades de agar verde claro: Agar glucosa novobiocina verde claro (NBG) y Agar glicerol lactosa novobiocina verde claro (NBGL).

Agar Glucosa Novobiocina Verde Claro (NBG)

Tiene dentro agar de tripsina de soja, citrato de amonio férrico, tiosulfato de sodio pentahidratado, rojo fenol, glucosa, verde claro, novobiocina y agua destilada.

Se usa para aislar colonias de salmonela a partir de muestras de heces.

En un caso así, el verde claro y la novobiocina son inhibidores que previenen el crecimiento de bacterias grampositivas y algunos microorganismos gramnegativos.

El tiosulfato de sodio es una fuente de sulfuro y el citrato férrico es una fuente de hierro, los cuales son precisos para detectar la producción de sulfuro de hidrógeno por la capacitación de precipitados de sulfuro de hierro negro.

La glucosa es un carbohidrato fermentable y el colorado fenol es un indicador de pH.

En este medio, las colonias de Salmonella son muy enormes, con un centro negro, un halo colorado alrededor y un área sobresaliente detrás. Citrobacter freundii Generan exactamente las mismas colonias que la salmonella.

Agar de glicerol lactosa verde refulgente de novobiocina (NBGL)

El medio tiene dentro agar de soja tríptico, citrato de amonio férrico, tiosulfato de sodio, lactosa, glicerina, verde claro, novobiocina y agua destilada.

La diferencia entre este medio y el medio previo es que se utiliza glucosa en lugar de lactosa y glicerina y no se utiliza rojo fenol.

Este medio asimismo se emplea para aislar Salmonella y las colonias aparecen negras debido a la producción de sulfuro de hidrógeno.

Solo las colonias que no producen ácido a partir de glicerina o lactosa pueden generar H.2S es suficiente, pues un valor de pH bajo conduce a la formación de H2. perturba2S. Resultan la mayor parte de las colonias incoloras de especies de Proteus y Citrobacter.

listo

- Pese 58 gramos de medio deshidratado libre comercialmente. Agréguelo a un litro de agua bidestilada. Mezclar, dejar descansar unos minutos, entonces poner la formulación bajo una fuente de calor hasta el momento en que se disuelva por completo.

- Autoclave durante 15 minutos a 121 ° C, no exceda el tiempo de esterilización.

- Cómelo caliente en una placa de Petri estéril. El pH final debe ser 6,9 ± 0,2.

-Dejar descansar y almacenar en el frigorífico hasta el momento de su empleo. Antes de la siembra, tienen que efectuarse a temperatura ámbito.

-El medio en polvo es verde y marrón anaranjado o rojo-verde tras la producción, en dependencia del valor de pH y de la empresa comercializadora. Un color muy cobrizo señala que el agar se ha sobrecalentado.

-Si el agar se ha solidificado, no se aconseja regresar a verterlo porque el medio se deteriorará.

Objeto / aplicación

Este medio se usa para conseguir cepas de Salmonella en muestras de heces y lácteos.

Como se trata de un entorno bastante inhóspito, se aconseja inocular grandes proporciones de inóculo cuando se usan muestras directas. De lo contrario, las muestras tienen que enriquecerse y enriquecerse antes en este medio antes de la siembra.

Ya que algunas cepas de Salmonella están inhibidas o son difíciles de cultivar, se aconseja usar este medio con otros agares selectivos de Salmonella.

Cada colonia que presente características propias de Salmonella debe someterse a pruebas bioquímicas para su identificación final.

seguro de calidad

Para probar el buen accionar del medio de agar verde claro, se puede usar la cepa A.C. para ver su avance en el mismo.

Las cepas más frecuentes para el control de calidad son: Salmonella enteritidis Centro de control de tráfico aéreo 13076, Salmonella typhimurium Antes de Cristo 14028, Proteus mirabilis Antes de Cristo 43071, Klebsiella pneumoniae Antes de Cristo 700603, Escherichia coli A.C. 25922, Â Shigella Antes de Cristo 12022, Staphylococcus aureus A.C. 6538.

Los 3 primeros tienen que conformar colonias con transparencia de color rosa o blanco sobre un fondo rojo. La salmonela crece bien y el Proteus medra poco o de manera regular.

Se aguardan colonias de color amarillo verdoso con un fondo amarillo para Klebsiella y Escherichia, al tiempo que tienen que eliminarse para Shigella y Staphylococcus.

El medio deshidratado debe almacenarse en un espacio seco a temperatura ambiente, en tanto que el medio es muy higroscópico.

referencia

  1. Laboratorio Difco Francisco Soria Melguizo SA Agar verde claro. Año 2009
  2. Laboratorio británico. Agar verde claro. 2015.
  3. Laboratorio de BD. Agar BD verde claro. Año 2013.
  4. Koneman E., Allen S., Janda W., Schreckenberger P., Winn W. (2004). Diagnóstico microbiológico. (5ª edición). Argentina, equipo editorial de Panamericana SA
  5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld A. 2009. Diagnóstico microbiológico de Bailey & Scott. 12 números. Argentina. Editor Panamericana SA

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